L’analisi dell'azoto prontamente assimilabile (APA) consente di gestire correttamente la fermentazione alcolica. La carenza di azoto può infatti causare un rallentamento o addirittura l'interruzione della fermentazione, che compromette gravemente la qualità e le caratteristiche organolettiche del vino. APA è la somma di due contributi, l'azoto inorganico presente nel vino come ione ammonio e l'azoto organico presente nella forma α-amino (amminoacidi). L'analisi APA, con il metodo CDR, consente di controllare la concentrazione dei due componenti separatamente, dando la possibilità di effettuare con elevata precisione, le correzioni necessarie prima e durante la fermentazione alcolica.
Il kit per azoto organico è selettivo per l'α-ammina ad esclusione della prolina. Infatti, questo aminoacido, presente in dosi elevate nel mosto, non contribuisce al miglioramento della fermentazione perché non viene metabolizzato dal lievito. Il metodo CDR per l’analisi dell’azoto è più accurato del numero di formalina, che intercetta parzialmente la prolina.
Il test dell'azoto inorganico è selettivo per l'ammonio e dà la possibilità di regolare la quantità di sali di ammonio da aggiungere nel mosto.

METODICA
Analisi di tipo End Point.
Tempo di analisi: 4 minuti.
Sono possibili sessioni di analisi con più campioni fino ad un massimo di 16 test per CDR WineLab^® e di 3 test per CDR WineLab^® Junior.

PRINCIPIO DEL TEST
Azoto Organico
L'azoto α-amminico reagisce, in presenza di N-acetil-L-cisteina, con l'o-ftalaldeide per formare il derivato isoindolico. La differenza di assorbanza, misurata a 366 nm (end-point) è correlata alla quantità di azoto organico espressa in mg/L di azoto.
Azoto Inorganico
L'ammonio reagisce per via enzimatica con NADH e α-chetoglutarato per dare NAD⁺ e glutammato. La diminuzione dell'assorbanza della soluzione di NADH, misurata a 366 nm (end-point), è proporzionale alla quantità di azoto inorganico nel campione.

Step 1/9

Se necessario, degassare il campione utilizzando l'apposito bagno ad ultrasuoni. In caso di analisi con mosto, chiarificare il campione con la centrifuga o con il kit di filtrazione.

Step 2/9

Mettere le provette contenenti il reagente R1 in una delle cella di incubazione e lasciarle scaldare per almeno 5 minuti.

Step 3/9

Prelevare 50 µl di R1a. Aggiungerli nella cuvetta contenente il reagente R1 senza toccare con il puntale il liquido al suo interno. In caso di contaminazione sostituire il puntale.

Step 4/9

Prelevare con la pipetta 20 µl di campione. Usare un nuovo puntale per ogni analisi per evitare inquinamenti dovuti ad analisi precedenti. Pulire bene la parte esterna del puntale della pipetta con carta assorbente, evitando il contatto tra l'estremità del puntale e la carta assorbente. Inserire il campione nella cuvetta e miscelare.

Step 5/9

Agitare delicatamente la cuvetta 2-3 volte. Inserire la cuvetta in una cella di incubazione ed avviare il timer premendo sull'icona.

Step 6/9

Agitare delicatamente la cuvetta 2-3 volte. Inserire la cuvetta nella cella indicata dalla luce blu e premere LEGGI.

Step 7/9

Prelevare con la pipetta 50 µl di R2. Aggiungerli nella cuvetta senza toccare con il puntale il liquido, R1 + R1a + campione, al suo interno. In caso di contaminazione sostituire il puntale.

Step 8/9

Agitare delicatamente la cuvetta 2-3 volte. Inserire la cuvetta in una cella di incubazione ed avviare il timer premendo sull'icona.

Step 9/9

Agitare delicatamente la cuvetta 2-3 volte. Inserire la cuvetta nella cella indicata dalla luce blu e premere LEGGI per avviare la lettura fotometrica.