Determinazione Acido D-3-Idrossibutirrico in ovoprodotti
La pastorizzazione dei prodotti a base di uova si basa sull'uso di temperature non elevate, poiché le proteine dell'uovo sono sensibili al calore. Per questo motivo, l'uso di uova in cattivo stato di salute o incubate aumenta il rischio per la salute umana e riduce la durata di conservazione dei prodotti freschi a base di uova. L'uso di uova incubate o in cattivo stato di salute può essere rilevato verificando la presenza di alcuni acidi organici indicativi di prodotti metabolici e di decomposizione microbica come acido succinico, acido lattico e acido D-3-idrossibutirrico.

Il metodo migliore che attualmente evidenzia questa frode è il test dell'acido D-3-idrossibutirrico, molto basso nelle uova fresche (<1 mg/kg), ma molto più elevato nei rifiuti dell'incubatrice. L'analisi viene generalmente effettuata mediante estrazione e gascromatografia. Il REGOLAMENTO (CE) N.853 / 2004 stabilisce che il livello di acido D-3-idrossibutirrico nei prodotti a base di uova non deve superare i 10 mg/kg di sostanza secca.

METODICA
Analisi di tipo Cinetica.
Tempo di analisi: 8 minuti.
Sono possibili sessioni di analisi con più campioni fino ad un massimo di 16 test per CDR FoodLab^® e di 3 test per CDR FoodLab^® Junior.

PRINCIPIO DEL TEST
L'acido D-3-idrossibutirrico reagisce, mediante una reazione enzimatica con il NAD⁺ e forma un complesso rosa la cui intensità, misurata a 505 nm, è direttamente proporzionale alla concentrazione di acido D-3-idrossibutirrico nel campione. Il risultato è espresso in ppm di acido D-3-idrossibutirrico.

ANALISI

Step 1/7

Omogeneizzare il campione: mettere 10 g di campione in un piccolo bicchiere, aggiungere 1 g di polimero e mescolare per qualche minuto usando, per esempio, un agitatore magnetico.

Step 2/7

Mettere poi una parte di questa miscela in una provetta e centrifugare per circa 5 minuti a 5000 giri. Utilizzare la soluzione limpida così separata.

Step 3/7

Prelevare con la pipetta 150 µl di campione. Usare un nuovo puntale per ogni analisi per evitare inquinamenti dovuti ad analisi precedenti. Pulire bene la parte esterna del puntale della pipetta con carta assorbente, evitando il contatto tra l'estremità del puntale e la carta assorbente. Inserire il campione nella cuvetta e miscelare.

Step 4/7

Agitare delicatamente la cuvetta 2-3 volte. Inserire la cuvetta in una cella di incubazione ed avviare il timer premendo sull'icona.

Step 5/7

Prelevare con la pipetta 50 µl di R2.

Step 6/7

Aggiungere 50 µl di R2 nella cuvetta senza toccare con il puntale il liquido, R1 + campione, al suo interno. In caso di contaminazione sostituire il puntale.

Step 7/7

Agitare delicatamente la cuvetta 2-3 volte. Inserire la cuvetta nella cella indicata dalla luce blu e premere LEGGI per avviare la lettura fotometrica.